储存条件： -20℃，避光，有效期至少1年

规格： 50T 100T

单位： 盒

胞浆蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取胞质蛋白，试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂，作用较为温和，可获得蛋白，可用于免疫印迹实验等基础研究实验，由于含有上述的酶抑制剂，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。

产品组成:

规格

储存条件

裂解液

100

ml

2-8 oC

磷酸酶抑制剂（100x）

1ml

-20 oC

蛋白酶抑制剂（100x）

1

ml

PMSF（100x）

1ml

操作方法:

1、组织总蛋白的提取

在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF；混匀，放置在冰上备用；

称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作；

将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g离心30min；

吸取上清至新的管中；

进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。

（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)

2、细胞总蛋白的提取

裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1ml；

贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，

将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20-30min

悬浮细胞：4 oC 400g离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，

涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次；

裂解完毕之后，将细胞裂解液4 oC 12000g离心30min；

将上清移入新的EP管中；

进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。

（提取好的蛋白建议保存于-80 oC，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存。)

注意事项：

实验过程，所有试剂都要需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境；

PSMF（有毒）现用现加，因为PMSF在水溶液中会快速降解；

备注：

以上数据均来自公开文献, Solarbio暂未进行独立验证, 仅供参考。

These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these

methods.

BC3740说明书.pdf

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