Performance

使用RNeasy Maxi Kit纯化的高品质总RNA适用于多种下游应用（参见"High-quality RNA from a variety of samples"）。RNeasy Maxi Kit可从大量的起始样本中高效纯化总RNA，包括动物或人类细胞、动物或人类组织以及酵母（参见下表）。

RNeasy Maxi Kit纯化得到的总RNA产量

来源 起始材料 平均产量 (mg)

动物细胞

            LMH                                      5 x 108                              5.7

            HeLa                                     4 x 108                             6.0

            COS-7                                   1.8 x 108                         5.8

            淋巴细胞 （未受激）            5 x 108                              0.3     

小鼠组织

            肝 (1 g)                                    1 g                              3.6

            肺 (0.5 g)                                0.5 g                             0.6

            脾 (1 g)                             1 g                             3.2

酵母细胞

            S. cerevisiae             1 x 109                                  2.4  

Principle

RNeasy Maxi Kit可从大量的起始样本中高效纯化总RNA。RNeasy技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度，简化了总RNA的纯化流程。可从动物或人类细胞、动物或人类组织以及酵母中简单的纯化总RNA。实验方案包括回收部分纯化的RNA、体外转录产物和酶反应中的RNA。RNeasy纯化得到的核酸适用于各种分子分析或其他下游应用。

Procedure

RNeasy技术简化了总RNA的纯化过程。先对样本（至多5 x 108个动物或人类细胞、2.5 x 109个酵母细胞或150 mg–1 g组织）进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜（参见"RNeasy Maxi spin column"）。RNA（至多6 mg）结合到膜上，污染物被高效洗去。可进行方便的柱上DNase处理，去除残留的DNA。之后用800–2400 µl水洗脱得到高浓度的RNA（参见"RNeasy Maxi procedure"）。还有许多特殊应用的实验方案可供选择。

Applications

RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1（10 mM Tris·Cl、pH 7.5的溶液中），适用于多种下游应用，包括：

Northern印迹、点印迹和狭缝印迹 

终点式RT-PCR 

real-time RT-PCR 

芯片分析 

Poly A+ RNA筛选