产品简介

本产品是专为两步法RT-PCR 第一步cDNA第一链合成研制的试剂盒，包含RNA到cDNA合成所需的所有试剂。

产品中的Goldenstar^TM RT6逆转录酶由改造的莫洛尼氏鼠白血病病毒逆转录酶(M-MLV RT)经体外大肠杆菌重组表达而来。野生型M-MLV RT在分子生物实验中有两个明显的缺点:(1)带有RNase H活性。它会降解RNA模板及中断cDNA链的合成；(2)热稳定性差。RNA以各种复杂的多级结构存在,提高逆转录反应的温度,破坏其复杂结构的稳定性有利于逆转录的顺利进行，但同时也使酶的活性大大降低。Goldenstar^TMRT 6逆转录酶解决了，上述两个问题。通过删除M-MLV RT的RNase H活性,能有效减少RNA模板的降解，使其聚合酶活性和持续性大大增强；其后通过随机突变筛选出热稳定性强的逆转录突变体，使其反应温度提高至55°C，有利于含复杂结构RNA的逆转录进行。

本产品提供的gDNA Remover可彻底去除RNA模板中残留的基因组DNA，qPCR结果更加可靠，并可简化qPCR引物设计，无需跨内含子设计引物。

产品应用

本产品合成的第-链cDNA可广泛用于第二链cDNA合成PCR扩增、杂交、cDNA文库制作、全长cDNA合成等。

产品特点

1.RNase H活性缺失，产量高，产物长；

2.热稳定性强,有利于含复杂结构RNA的逆转录进行；

3.快速去除基因组污染。

注意事项

1.实验中应避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染。操作人员需佩戴口罩和一次性手套，实验中经常更换手套，使用RNase-free耗材。

2.为保证逆转录成功，请使用高质量的RNA。推荐使用琼脂糖凝胶电泳的方法检测RNA完整度。

3.本产品中各组分在冰上解冻后，应充分混匀并短暂离心后使用。

4.逆转录产物用于扩增反应时，其使用量不应超过总反应体积的10%。

5.逆转录酶的一个活性单位被定义为：使用Poly(A)为模板， Oligo(dT)₁₇为引物，在37°C反应10 min，将1 nmol的dTTP转化为产物所需的酶量。

保存条件

-25~-15°C保存，保质期1年。.

本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。

TSK302-Goldenstar® RT6 cDNA Synthesis Kit Ver.2说明书V1.1.3.pdf