产品简介

TSBL21（DE3）pLysS Chemically Competent Cell衍生于大肠杆菌BL21系列菌株，包含低拷贝的氯霉素抗性质粒(可与pET28a、GEX4T-2等常见质粒兼容)，可少量表达T7溶菌酶，在未诱导情况下，该酶能与T7 RNA聚合酶结合并抑制其功能，当加入IPTG诱导表达时，T7 RNA聚合酶大量表达， 细胞中少量的T7溶菌酶不会对大量存在的T7 RNA聚合酶产生较大的抑制作用。因此该质粒既可以降低外源基因的泄露表达，也不干扰IPTG的诱导表达，相对于BL21 (DE3)感受态细胞可以降低90%的本底表达，可用于毒性蛋白的表达。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成，使用pUC19质粒DNA检测，转化效率可达1×108 cfu/µg。

使用方法

1.取100 µL冰上融化的感受态细胞，加入目的质粒，轻轻混匀，冰上静置30 min。

2.42℃水浴热激45~60 s，迅速转移至冰浴中，静置2 min (冰上静置过程中请勿晃动样品，否则会降低转化效率)。

3.向离心管中加入700 µL不含抗生素的无菌液体培养基 (SOB或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60 min。

4.根据实验需要，吸取不同体积的复苏液均匀涂布到含相应抗生素的SOB或LB培养基上，将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

注意事项

1.感受态细胞冰上融化；

2.实验过程中轻柔操作；

3.请勿反复冻融

4.转化后涂板，平板不可加入氯霉素，否则双抗生素条件下，细菌生长十分缓慢。但诱导表达摇菌时，应加入双抗，防止氯霉素质粒丢失（此时生长速度正常）。

保存条件

-83~-78℃保存6个月。

本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。

TSC-E05 TSBL21（DE3）pLysS 感受态 说明书V1.1.1.pdf