产品简介

DH10Bac感受态细胞用于生产真核蛋白表达用的重组杆状病毒分子(Bac-to-Bac杆状病毒表达系统)。DH10Bac细胞含有父代杆状病毒穿梭载体Bacmid（bMON14272）和辅助质粒（pMON7142），前者含有低拷贝mini-F复制子、卡那抗性基因、attTn7位点和lacZα互补因子，后者含有tnsABCD区（表达转座所必须的转座蛋白）和四环素抗性。供体质粒pFastBac（具有庆大霉素抗性）上mini-Tn7位点和bMON14272上mini-attTn7之间发生转座，可产生重组Bacmid，经筛选提取后可用于昆虫细胞转染和之后的外源重组蛋白表达。mcrA、mcrBC及mrr突变使DH10Bac菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。本产品经特殊工艺制作，使用pUC19质粒DNA检测，转化效率>108 cfu/µg 。

使用方法

1.取100 μL冰上融化的感受态细胞，加入供体质粒(pFastBac等)，轻轻混匀，冰上静置30 min。

2.42 ℃水浴热激45~60 s，迅速转移至冰浴中，静置2 min (冰上静置过程中请勿晃动样品，否则会降低转化效率)

3.向离心管中加入700 μL不含抗生素的无菌培养基(SOB或LB)，混匀后37 °C，200 rpm复苏60 min。

4.根据实验需要，吸取不同体积的复苏液均匀涂布到含相应抗生素的SOB或LB培养基上，将平板倒置放于37°C培养箱过夜培养。

注意事项

1.感受态置于冰上融化；

2.实验过程中轻柔操作；

3.请勿反复冻融。

【保存条件】

-83~-78°C保存6个月。

本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。

TSC-C15 DH10Bac Chemically Competent Cell说明书.pdf