产品简介

EPI300菌株基因组整合了突变的trfA基因，在未添加诱导 剂情况下，携带有oriV复制?的质粒拷贝数约1-2 copies/cell， 添加诱导剂L-阿拉伯糖情况下 ， 质粒拷贝数 可增加到约 15~20 copies/cell， 因此该菌株特别适用于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆；缺失核酸内切酶 (endA1)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA1)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性 ；mrr-hsdRMS- mcrBC基因缺陷使得EPI300适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA；ø80dlacZ∆M15使得EPI300可用于蓝白斑筛选；rpsL赋予该菌株链霉素抗性。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成，使用pUC19质粒DNA检测，转化效率可达 5X108cfu/µg。

使用方法

1.取100µL冰上融化的感受态细胞，加入目的DNA(质粒或连接产物)，轻轻混匀，冰上静置30 min。

2.42℃水浴热激45~60 s，迅速转移于冰浴中，静置2 min(冰上静置过程中请勿晃动样品，否则会降低转化效率)。

3.向离心管中加入700µL不含抗生素的无菌培养基（SOB或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60 min。

4.根据实验需要，吸取不同体积的复苏液均匀涂布到含相应抗生素的SOB或LB培养基上，将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

注意事项

1.感受态置于冰上融化。

2.实验过程中轻柔操作。

3.请勿反复冻融。

保存条件

-83~-78℃保存6个月。

本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。