测定意义：血磷主要指血中的无机磷盐以无机磷盐的形式存在。血浆中钙、磷浓度关系密切。在以mg/dL 表示时，两者的乘积(［Ca］×［P］)为30～40。当(［Ca］×［P］)>40，则钙和磷以骨盐形式沉积于 骨组织。若(［Ca］×［P］)<35 则妨碍骨的钙化，甚至可使骨盐溶解，影响成骨作用。血钙和血磷 含量的相对稳定依赖于钙、磷的吸收与排泄和钙化及脱钙两种代谢的相对平衡。上述平衡受到维生 素D3、甲状旁腺素和降钙素等激素的调节。,测定原理：去除血清中有机磷后，无机磷盐与钼酸铵试剂生成磷钼酸，被硫酸亚铁还原后呈蓝色。在660nm 有光吸收；通过测定660 nm吸光度，计算血液中磷含量。,自备仪器和用品：可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。,血磷浓度测定操作：,1. 分光光度计预热30min以上，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。,2. 取出标准液，室温解冻。,3. 血清预处理：吸取50 µL血清，加950µL试剂一，混匀后室温8000rpm，离心10min，取上清液， 待测。,4. 空白管：取1mL玻璃比色皿，依次加入250µL 蒸馏水，250µL试剂一，500µL试剂三，混匀后静 置10min，于660 nm 测定吸光度记为A空白管。,5. 标准管：取1mL玻璃比色皿，依次加入250µL 标准液，250µL试剂一，500µL试剂三，混匀后静 置10min，于660 nm 测定吸光度记为A标准管。,6. 测定管：取1mL玻璃比色皿，依次加入250µL 上清液，250µL试剂一，500µL试剂三，混匀后静 置10min，于660 nm 测定吸光度记为A测定管。,血磷浓度计算：,血磷含量（m mol/dL）=[C标准液平×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×样品稀释倍数×V样总=0.04×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管) C 标准液：0.02 mmol/L；样品稀释倍数：（50 µL血清+950µL试剂一）÷50 µL 血清=20：V样 总：100 mL=0.1 L。,1、试剂三需临用前配制，如未用完，4℃保存，最多可使用3 天。,2、测定过程中，应尽量避免溶血，因为红细胞中有机磷酯进入血清后可被酶水解而使得血清无机 磷含量增高。