乙酰乙酸(AcAc)是酮体的重要成分之一，约占正常人酮体总量20%，是脂肪酸通过氧化产生的,是一种较强的有机酸。正常含量的乙酰乙酸对人体无害，糖尿病患者由于糖的利用降低，或饥饿时由于糖的代谢障碍，大量动用脂肪，乙酰乙酸的量都会积累。乙酰乙酸即可转化成丙酮，也可以转化成β-羟丁酸。,在pH 7.0和37℃条件下，AcAc在β-羟丁酸脱氢酶（HBDH）催化下发生反应，同时NADH被氧化成NAD+；在1-mPMS作用下，WST-1可与NADH反应，产生水溶性formazan，在450nm下有特征吸收峰。通过检测450nm下波长变化，可计算出AcAc的含量。